宽分子量非变性电泳蛋白质Marker II（21-880 kD）

 

Broad MW Native Electrophoresis Protein Marker II（21-880 kD）

 

名称	货号	规格
宽分子量非变性电泳蛋白质Marker II（21-880 kD）	RTD6136	20次（100 μl）

●储存、运输及效期：

-20℃保存，湿冰运输，有效期为12个月。

● 产品简介：

    本产品有5种蛋白组成，分子量范围为21-880 kD，经过非变性电泳后，用考马斯亮蓝染色后可以得到6条主带。

蛋白名称	分子量(kD)	蛋白来源	pI	说明
Ferritin	440 880	equine spleen	N/A	非变性下440kD和880 kD
RC2	200	重组蛋白	6.7	单体蛋白分子量为75 kD，在Tris-甘氨酸非变性下表现为分子量~200 kD
RC1	75	重组蛋白	5.9	单体蛋白分子量为75 kD，在Tris-甘氨酸非变性下表现为分子量~75 kD，同时会形成少量二聚体（dimer）
Ovalbumin	45	egg white	5.2	球蛋白，分子量为45kD，非变性条件下大于45 kD会出现电荷异构体（charge isomer）
Trypsin Inhibitor	21	Soybean	4.5	非变性下21 kD

 

● 使用说明：

 

1. 取出产品后，常温融化后，彻底混匀，上样电泳。

注：上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，1.0厚度10齿梳子加样孔上样5 μl，1.0厚度15齿梳子加样孔上样量2.5 μl，其他规格梳子请适当调整上样量。

2. 该产品不含蛋白凝胶制备试剂，您可以选择非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒（货号：

RTD6130或RTD6135）。如自备试剂，经典Laemmli系统中把制胶溶液、电泳缓冲液和上样缓冲液中的SDS和还原剂（DTT或β-巯基乙醇）全部去除即可进行非变性电泳。

3. 电泳条件：

建议使用10%非变性胶或者4-15%梯度非变性胶（货号：RTD6117-0415）进行电泳。

恒电压	120 V
起始电流	27-35 mA/板胶
结束电流	7-10 mA/板胶
电泳时间	1h20min+

4. 电泳结束后，考马斯亮蓝染色，观察结果。

注：使用银染染色时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，需要适当降低Marker上样量，一般稀释50倍后上样。

注意：

1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳（SDS-PAGE），因为在SDS存在下，含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。

2. 在非变性条件下，蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关，因此不能精确判断待测蛋白的分子量，只能粗略判断蛋白的大小。

● 实验示例：

1. 4-15%Tris-甘氨酸非变性胶

2. 8%Tris-甘氨酸非变性胶

3. 3-12% BlueNative