10×膜蛋白A型上样缓冲液

● 产品简介

该产品配套动物膜蛋白提取试剂盒（货号：RTD8111，RTD8112）和动物线粒体提取试剂盒（货号：RTD8115，RTD8116）使用。产品含有甘油和G-250，为10倍浓度，使用时稀释10倍使用。产品用于Blue-Native电泳上样使用，不适用于其他系统（如Tris-甘氨酸系统，Bis-Tris系统，HEPES系统，Tricine系统等）电泳。

● 贮存、效期和运输：

-20℃贮存；一年有效；湿冰运输。

● 使用方法：

1 膜蛋白BN非变性样品处理：

1.1 建议使用50 μl膜蛋白重悬液（BN电泳用）（货号：PN1020）重悬膜蛋白沉淀；

1.2 BCA方法测定蛋白浓度（货号：RTP7102）；

1.3 用膜蛋白重悬液（BN电泳用）调整蛋白浓度为1 μg/μl，按需分装，每管50 μl，-80℃保存待用；

1.4 取一管50 μl样品，溶化混匀后4℃ 16000 g 5分钟，去除上清，保留沉淀；

1.5 沉淀中加入50 μl膜蛋白增溶液A（货号：DM1080），轻柔重悬沉淀，尽量不产生气泡，冰浴10分钟；

1.6 4℃ 16000 g 15分钟，取上清至一干净1.5 ml离心管中即为增溶后膜蛋白溶液（小心不要吸取沉淀），此时得到的膜蛋白浓度为1 μg/μl，其中去垢剂DDM（n-Dodecyl β-D-maltoside，β-DM n-十二烷基-β-D-麦芽糖苷）终浓度为1%；

1.7 膜蛋白溶液中加入1/10体积10×膜蛋白A型上样缓冲液（配套膜蛋白增溶液A使用）（货号：PL130），使用BN凝胶电泳（货号：RTD6139，RTD6140），每个泳道上样5-20 μg。