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快速锌染蛋白染色试剂盒

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    快速蛋白锌染试剂盒

    产品编号

    规格

    运输

    RTD6206

    10 T

    RT

     

    ● 产品组成:                                                        Ver.720359

    产品编号

    产品名称

    规格

    贮存

    运输

    RTD6206-01

    增强液(100×)

    5 ml

    RT

    RT

    RTD6206-02

    染色液(10×)

    60 ml

    4-8℃

    RT

    RTD6206-03

    显色液(10×)

    60 ml

    4-8℃

    RT

    RTD6206-04

    脱色液(10×)

    100 ml

    4-8℃

    RT

    -

    说明书

    1份

    -

    -

     

    ● 产品简介:                                                   

    本试剂采用以锌离子为基础的负染色方法,用于SDS-PAGE或Native-PAGE电泳凝胶染色,不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸,实验方便快速,可以在30 min左右完成,最低能够检测出2 ng的蛋白条带,该方法不对蛋白质产生修饰作用,而且经过脱色液处理后,可以用于电洗脱或采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒(货号:RTD8108)进行胶回收,以便进行质谱和测序分析等,也可以用于电转移或用其他染色方法(银染或考染)对胶重新染色。

    按照每次使用50 ml1×即用型染色液计算,本产品可以染色 8-10块mini-PAGE(8×10cm)胶。

    ● 储存条件

    按照标签温度贮存,常温运输。开封后一年有效。

    ● 凝胶染色的操作步骤:

    以下步骤以一块1 mm厚度8×10cm的凝胶操作为例。

    一. 漂洗:

    取出电泳后的 PAGE 凝胶,用超纯水漂洗两次,每次1分钟。

    二. 染色:

    2.1 准备1×即用型染色液:

    组份

    50 ml 1×即用型染色液

    染色液(10×)

    5 ml

    增强液(100×)

    0.5 ml

    超纯水

    定容至50 ml

     

    2.1凝胶染色:

    凝胶中加入50 ml 1×即用型染色液,常温摇床慢摇10分钟。

    注:增强液(100×)在低温条件下会产生白色沉淀,请在使用前60℃水浴中加热,震荡至完全溶解后使用。

    三. 漂洗:

    弃染色液,用超纯水漂洗凝胶两次,每次1分钟,至泡沫完全清除干净。

    四. 显色:

    4.1 准备工作:将显色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型显色液。

    4.2凝胶中加入 50 ml 1×即用型显色液中,摇床慢摇30-60秒。观察结果:在黑色背景下,可见光观察,蛋白条带为棕褐色,无蛋白区域为类白色;可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色,无蛋白的胶区则为白色。

    五. 漂洗:

    弃显影液,超纯水洗涤凝胶2次,每次摇床慢摇1分钟。

    注:凝胶可以在水中保存1-2周。

    六. 脱色:

    6.1 准备工作:将脱色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型脱色液。

    6.2 如需要进行蛋白切胶回收,将所需的蛋白质条带切下,用超纯水漂洗切下的凝胶一次;如凝胶需要考染,银染或转膜实验,直接用超纯水漂洗整个凝胶一次。

    6.3 弃水,凝胶中加入适量1×即用型脱色液覆盖凝胶,摇床慢摇5分钟,倒掉脱色液;

    6.4 重复脱色步骤2次。脱色完全的标志是白色凝胶完全脱色为无色透明。

    6.5 超纯水漂洗凝胶两次,进行后续实验操作。

     

     

    ●  实验示例:

                 4-20% RealPAGE Precast Gel
    lane 1-4: BSA 10μg
    M:RTD6149 10-250kD
    lane 5: Bacterial Lysis
    凝胶显影后(脱色前)蛋白条带在黑色背景下为棕褐色
    可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色

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